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    蛋白定量

    NUCLEIC ACID PURIFICATION

    【新品】Enterokinase

    发布者:博迈德生物发布时间:2019-09-05179

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    PA132-01
    【新品】Enterokinase
    1000U
    998
    PA132-02
    1000U×5
    4490

    温度:

    Enterokinase(10 U/μl)长期储存于-80℃,可保存2年;或小量分装后保存于-20℃,可保存6个月,避免反复冻融。10× EK Buffer置于-20℃保存即可。

    产品介绍:

    肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经多步纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。本公司肠激酶是自毕氏酵母表达经亲和和离子等纯化的重组蛋白酶。

    酶活性单位定义:

    1 U定义为在25℃,12 h~16 h之内,将0.5 mg融合蛋白在25 mM Tris-HCl(pH8.0)缓冲液中的切割95%所需的酶量。

    操作方法

      若蛋白为热不稳定性,请在4°C孵育较长时间或增加酶的用量。

          1. EP管中配置如下反应体系:

    132.png

         2. 混匀上述体系后于30孵育,在 1246小时分别吸出30 μl上述反应液,置于单独的EP管中。

         3.  向上述EP管中加入20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C

         4. 30 μl样品进行SDA-PAGE分析。

    注意事项

      咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50 mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,否则将影响酶切活性。


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